犬用凍精稀釋液 狗精子冷凍稀釋

應(yīng)用于犬人工授精，尤秀犬種育種保種工作，犬冷凍精液生產(chǎn)制作；

稀釋液的準(zhǔn)備：

1.先把犬凍精生產(chǎn)用的A和B液回暖到室溫；

2.按體積的20%，加新鮮蛋黃到A液體和B液中（比如4毫升蛋黃到20毫升瓶的A液；2毫升蛋黃到10毫升瓶的B液）；

3.手搖把內(nèi)含液混勻；

4.把A液保存在室溫，用于步驟1；

5.把B液瓶冷卻到+4°C，用于步驟2；

6.只用富含精子的精液部分來生產(chǎn)凍精。

沖洗：

1.如果收集的精液混有前列腺液，先按1份原精加3-5份A液稀釋，然后在700g重力下離心10-15分鐘；

2.丟棄上清液；

3.小心緩慢地用A恢復(fù)到富含精子的體積（根據(jù)以往經(jīng)驗，2-3毫升），混勻（重組精液）。

冷凍操作：

步驟1：＊對每份原精（或重組精液），對等緩慢加1份A液，降溫到+4°C。

＊通常保存在+4°C至少兩個小時。

步驟2：＊對+4°C保存后的混合精液，用1到3分鐘慢慢加B液（也在+4°C），加入B液的量同原始富含精子的體枳相等。

＊在+4°C下填充預(yù)冷卻的細(xì)管并封口。

＊繼續(xù)在+4°C保存60分鐘。

＊把細(xì)管放在液氮面上方5厘米處至少20分鐘后再整個沉浸到液氮中。

解凍：

1.細(xì)管在+38°C解凍1分鐘；

2.把解凍的精液合并到一試管中，添加等量事先預(yù)溫到+38°C精液。

3.立即做子宮內(nèi)或開腔犬人工授精。

蛋黃的準(zhǔn)備和添加：

1.把新鮮雞蛋用70％酒精洗凈，晾干；

2.打開雞蛋，保持卵黃膜不破；

3.分離卵黃與蛋清；

4.把蛋黃在干凈無絨的紙巾上滾動，黏走后的蛋白；

5.用干凈的針筒把蛋黃吸到無菌的燒杯里，丟棄蛋黃膜；

6.用校準(zhǔn)過的針筒或移液槍加定量的蛋黃到稀釋液。

包括：水，檸檬酸納，TRIS，葡萄糖，甘油，檸懞酸，MOFA專有護精因子和慶大霉素；

保存：冷藏于+2°C到+8°C。用無菌方法從小瓶拿出稀釋液。過期作廢。

注意：防止兒童接觸。不可人和動物食用，藥用和臨床用，不能注射用。